A.①③⑤ B.②③⑤ C.②④⑤ D.②④⑥
解析 PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解旋与结合。PCR仪实质上是一台能够自动调控温度的仪器。当温度上升至95 ℃时,DNA分子变性,解开双螺旋结构;温度下降到50 ℃左右(55 ℃),引物与DNA单链结合,DNA恢复双螺旋结构,恢复活性;温度上升至72 ℃,DNA分子开始复制、延伸,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
答案 C
二、非选择题(共30分)
6.(14分)PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种TaqDNA聚合酶。
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用________。
(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。
①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?
__________________________________________________________。
②TaqDNA聚合酶的功能是______________________________________。
③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和________法进行分离。
④为了使TaqDNA聚合酶能够多次反复利用,可采用______技术,常用的方法为____________________________。
(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是________,原因是__________________________________________________________。
(4)相对于细菌分离,DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。
①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:________、________。
②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?____________________________________________________________
________________________________________________________。
(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________中才能进行,并且要严格控制________条件。
(6)PCR中加入的引物有________种,加入引物的作用是____________________。
答案 (1)高温使DNA分子热变性
(2)①热泉70~80 ℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物
②催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
③凝胶色谱 电泳
④固定化酶 化学结合法、物理吸附法